冷冻杂交瘤细胞的准备和运输指南

冷冻细胞的准备和运输

仅冷冻保存细胞活力90%以上的快速生长和分裂期的杂交瘤（对数生长期杂交瘤）细胞。如可能，发送各细胞系的一式两份样品。

• 在无菌条件离心管中收获对数生长期杂交瘤细胞，并使用血细胞计数器和台盼蓝进行细胞计数。
• 在室温下以200 g（或1,000 rpm）对管中的细胞离心5分钟。
• 小心取出培养基，并将细胞团块重悬于冷冻培养基（含90%胎牛血清和10% DMSO的DMEM）中，使最终细胞密度为5-10×10⁶个细胞/ml。
• 以1.0 ml/瓶分装至冷冻管中。
• 将冷冻管置于冷冻容器或其他适当容器中，并置于冷冻箱中-80℃下过夜。
• 次日，将冷冻管转移至液氮罐中。如果使用足量干冰包装，也可选择隔夜后快递运输冷冻细胞。使用液氮罐或冷冻管时，请戴手套和面罩。

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