RNP(Cas9和sgRNA)复合物VS传统质粒/慢病毒的优势
- 无DNA干扰:避免非预期的基因片段插入
- 无免疫反应干扰:杜绝影响宿主细胞的因素
- 转染效率高:适合质粒转染效率低的宿主细胞
- 简便快捷:不需转录表达与降解质粒,缩短实验周期
- 提高编辑效率:Cas9蛋白与sgRNA结合效率高、更稳定
- 降低脱靶效应:Cas9蛋白与sgRNA非持续表达,可降解
sgRNA VS crRNA:tracrRNA 的优势
- 操作便捷:无需退火操作使crRNA和tracrRNA结合
- 更稳定:与Cas9蛋白结合更牢固
- 编辑效率更高:提高实验效率与成功率,原代细胞、干细胞优选
crRNA:tracrRNA(2条)和sgRNA(1条)用于CRISPR基因编辑
crRNA:tracrRNA:1条crRNA序列与靶序列结合,1条tracrRNA与Cas9蛋白结合。
sgRNA:1条序列,约20nt序列与靶序列结合,约80nt序列与Cas9蛋白结合。